$\rm Gamma-crystalin$是一段有特殊结构的$\rm DNA$片段，能被                 识别并结合，驱动基因的持续                 过程。

$\rm Gamma-crystalin$是启动子，是一段有特殊结构的$\rm DNA$片段，能被$\rm RNA$聚合酶识别并结合，驱动基因的持续转录过程。

将$\rm gsdf$定向插入载体，切割$\rm gsdf$基因用到的限制酶是                 ，除了限制酶外构建重组质粒还需要用到的工具酶有                 。

根据图示可知，目的基因插在启动子和$\rm egfp$报告基因之间，且目的基因内部含有$ Bam\rm H$ Ⅰ的切割位点，因此不能选择$Bam\rm H$ Ⅰ切割，目的基因的右侧含有$Hin\rm d$ Ⅱ和$BsrG$Ⅰ的切割位点，但报告质粒载体的$\rm egfp$报告基因中存在$BsrG$ Ⅰ的切割位点，因此不能选择$BsrG$Ⅰ切割，故目的基因和报告质粒载体都应选择$Eco\rm R$ Ⅰ和$Hin\rm d$Ⅱ切割，可保证目的基因正确连接在启动子和$\rm egfp$报告基因之间，切割后的目的基因和载体还需要$\rm DNA$连接酶连接才能形成荧光素酶报告质粒。

构建重组质粒时，需要把$\rm gsdf$基因的对应终止密码子的$\rm 3$个碱基对去除，原因是                                                                ，转基因斑马鱼发绿色荧光的组织是                。

保证$\\rm gsdf$编码的蛋白和$\\rm egfp$编码的蛋白形成融合蛋白（或如果不去除$\\rm gsdf$基因的对应终止密码子的$\\rm 3$个碱基对则该融合基因转录产生的$\\rm mRNA$翻译时会提前终止，无法得到融合蛋白）；眼部晶状体

本操作的目的是最终成功获得表达融合蛋白的转基因斑马鱼，因此需要让$\rm gsdf$基因与增强型绿色荧光蛋白基因（$\rm egfp$）共用一个启动子和终止子，使其同时转录和翻译，故需要把$\rm gsdf$基因的对应终止密码子的$\rm 3$个碱基对去除，保证$\rm gsdf$编码的蛋白和$\rm egfp$编码的蛋白形成融合蛋白。由于融合基因的启动子是使相关基因在眼部晶状体特异性表达，故转基因斑马鱼发绿色荧光的组织是眼部晶状体。