$\rm DEX$是糖皮质激素类药物。肾上腺分泌的糖皮质激素通过                 运输作用于靶细胞，调控相关基因表达，参与血糖调节，还具有免疫抑制作用。

肾上腺分泌的糖皮质激素的调节属于体液调节，因此肾上腺分泌的糖皮质激素通过体液运输运输到全身，与靶细胞上的特异性受体结合，作用于靶细胞。

用$\rm DEX$和$\rm RU486$（糖皮质激素受体拮抗剂）处理小鼠，提取肝细胞$\rm RNA$进行检测，结果如下图$\rm 1$。实验结果表明                                                                                  。

$\\rm DEX$与糖皮质激素受体结合后，促进了$\\rm K$基因的转录

由图可知单独用地塞米松（$\rm DEX$）处理的小鼠肝脏细胞$\rm K$基因的$\rm mRNA$水平相对值升高，$\rm DEX$是糖皮质激素类药物，用$\rm DEX$和$\rm RU486$（糖皮质激素受体拮抗剂）处理小鼠，肝脏细胞$\rm K$基因的$\rm mRNA$水平相对值与未加入地塞米松（$\rm DEX$）处理的一致，$\rm DEX$无法与靶细胞的皮质激素受体结合，说明$\rm RU486$能阻断$\rm DEX$与糖皮质激素受体结合，因此实验结果表明$\rm DEX$与糖皮质激素受体可以结合，促进$\rm K$基因的转录。

用$\rm DEX$处理小鼠和体外培养的小鼠肝细胞，均检测到肝细胞糖异生（非糖物质转化为葡萄糖的过程）关键基因$\rm P$转录水平提高。为研究$\rm K$蛋白调控$\rm P$基因转录的作用位点，获取了$\rm P$基因$\rm -729\sim +82bp$区域的不同片段以及突变片段，将其连接到荧光素酶基因（$\rm Luc$）上游并转入高表达$\rm K$基因的细胞系中，检测荧光强度，结果如下图$\rm 2$。由图$\rm 2$结果推测，$\rm K$蛋白结合在$\rm P$基因的$\rm -174\sim +82bp$区域，依据是                                                                                  。

前三组均含有$\\rm -174\\sim +82bp$区域，在$\\rm K$蛋白作用下荧光强度基本一致。第$\\rm 4$组$\\rm -174\\sim +82bp$区域发生突变后，荧光强度显著低于前三组

用$\rm DEX$处理小鼠和体外培养的小鼠肝细胞，均检测到肝细胞糖异生（非糖物质转化为葡萄糖的过程）关键基因$\rm P$转录水平提高，说明用$\rm DEX$促进$\rm K$基因表达$\rm K$蛋白，$\rm K$蛋白又可以调控$\rm P$基因的表达。研究$\rm K$蛋白调控$\rm P$基因转录的作用位点，获取了$\rm P$基因$\rm -729\sim +82bp$区域的不同片段以及突变片段，将其连接到荧光素酶基因（$\rm Luc$）上游并转入高表达$\rm K$基因的细胞系中，检测荧光强度，荧光强度高说明$\rm P$基因表达高，据图所知，前三组荧光强度较高，而第四组$\rm P$基因的$\rm -174\sim +82bp$区域基因突变，荧光强度也较低，说明$\rm P$基因表达下调，可能是该区域基因突变，$\rm K$蛋白无法与该区域结合，无法促进$\rm P$基因表达，因此荧光轻度较低。

分离（$\rm 2$）中小鼠肝脏细胞核物质，用超声波破碎$\rm DNA$（与蛋白质结合区不易被超声波破碎），分别加入抗$\rm K$抗体（$\rm A$）和无关抗体（$\rm B$），进行免疫沉淀实验。以沉淀下来的$\rm DNA$为模板，根据$\rm P$基因$\rm -729\sim -174$、$\rm -174\sim +82bp$区域序列分别设计引物进行$\rm PCR$，电泳结果支持（$\rm 3$）的结论。请在下图$\rm 3$中补充实验结果                                                                                  。

用$\rm DEX$处理促进$\rm K$基因表达$\rm K$蛋白，$\rm K$蛋白结合$\rm P$基因的$\rm -174\sim +82bp$区域，加入抗$\rm K$抗体（$\rm A$）与$\rm K$蛋白结合， $\rm K$蛋白无法与$\rm P$基因的$\rm -174\sim +82bp$区域结合，$\rm -174\sim +82bp$区域的$\rm DNA$未与蛋白质结合，被超声波破碎，沉淀下来作为模板进行了$\rm PCR$，而加入了无关抗体（$\rm B$）的，$\rm K$蛋白结合$\rm P$基因的$\rm -174\sim +82bp$区域，未被超声波破碎，也就没有$\rm PCR$产物。

综合上述研究，推测长期服用$\rm DEX$引发糖尿病的分子机制                                                                                  。

地塞米松与糖皮质激素受体结合后促进$\\rm K$基因的表达，$\\rm K$促进$\\rm P$的表达，增强糖异生过程。长期服用，导致高血糖进而导致糖尿病

用地塞米松（$\rm DEX$）处理的小鼠肝脏细胞内$\rm K$基因的$\rm mRNA$水平相对值升高，说明$\rm K$基因表达增强，而根据题意，$\rm K$基因的表达产物$\rm K$蛋白结合$\rm P$基因$\rm -729\sim +82bp$区域对$\rm P$基因的表达进行调控，$\rm P$基因的表达增强糖异生的过程，将非糖物质转化为葡萄糖，因此长期服用地塞米松（$\rm DEX$），导致高血糖进而导致糖尿病。