为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除                 ，因为后者产生的                 会抑制侧芽的生长。

顶芽产生的生长素会抑制侧芽的生长，顶芽的存在可导致顶端优势，进而影响侧枝上花蕾的形成，所以需要除去顶芽，以促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾。

为筛选出已转化的个体，需将$\rm T_1$代播种在含                 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为$\rm T_2$代）。

野生型拟南芥是否被农杆菌转化，可在个体水平进行检测，看它是否具有抗除草剂性状。因此可将其种植在含除草剂的培养基中。

为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将$\rm T_2$代播种在含                 的培养基上，获得所需个体。

为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将$\rm T_{1}$代播种在含盐的培养基上，获得所需个体，经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。

经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与                 植株进行杂交，再自交                 代后统计性状分离比。

单基因突变引起的变异，其遗传符合基因分离定律，就可用变异株与野生型植株杂交，而后自交一代，统计自交后代性状分离比进行判断。如果出现$\rm 3:1$的分离比，则为单基因突变。

若上述$\rm T-DNA$的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性                 。

由$\rm (3)$中“抗盐性状的突变体”信息知：野生型基因的存在导致植物的抗盐性降低。

根据$\rm T-DNA$的已知序列，利用$\rm PCR$技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取                 植株的$\rm DNA$，用限制酶处理后，再用                 将获得的$\rm DNA$片段连接成环（如下图）以此为模板，从图中$\rm A$、$\rm B$、$\rm C$、$\rm D$四种单链$\rm DNA$片段中选取作为引物进行扩增，得到的                 片段将用于获取该基因的全序列信息。

环状$\rm DNA$示意图

$\rm A$、$\rm B$、$\rm C$、$\rm D$表示能与相应$\rm T-DNA$链互补、长度相等的单链$\rm DNA$片段；箭头指示$\rm DNA$合成方向。

$\rm T-DNA$存在于诱导形成的拟南芥突变体植株的$\rm DNA$中。$\rm DNA$连接酶可将不同的$\rm DNA$片段进行连接。因为$\rm DNA$两条链反向平行，由图示环状$\rm DNA$外侧链$\rm DNA$合成方向可判断，$\rm DNA$扩增过程所选的引物应为$\rm B$、$\rm C$，这样可确保被插入的基因片段得到复制。要注意$\rm DNA$两条单链反向平行，$\rm B$、$\rm C$作为引物可保证插入的基因片段优先复制。