检测发现细胞的$\rm CLDN6$蛋白能够促进肿瘤发生，选定其作为单克隆抗体的作用靶点。$\rm CLDN6$蛋白是一个跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，制备免疫小鼠所用的抗原时，应提取                 区基因序列用于设计抗原。

$\rm CLDN6$蛋白是一个跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，其中抗原特性由胞外区决定，因此制备免疫小鼠所用的抗原时，应提取胞外区基因序列用于设计抗原。

将$\rm CLDN6$蛋白抗原注射到小鼠体内，从该小鼠脾脏中获取                 细胞，利用                 诱导此细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞，通过克隆化培养和抗体阳性检测，多次筛选得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，最终可通过                 培养获得大量单克隆抗体。

将$\rm CLDN6$蛋白抗原注射到小鼠体内，能引发机体产生特异性免疫，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的$\rm B$淋巴细胞。诱导动物融合中常用的生物诱导因素是：$\rm PEG$（聚乙二醇）或灭活病毒。多次筛选得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞可以在体外条件下做大规模培养（体外培养），或注射到小鼠腹腔内增殖（体内培养）。

将该单克隆抗体与抗癌药物$\rm DM1$结合构建抗体$\rm ——$药物偶联物$\rm CLDN6-DM1$。用不同浓度的游离$\rm DM1$、$\rm CLDN6-DM1$或$\rm lgG-DM1$（无关抗体$\rm -DM1$）分别处理高表达$\rm CLDN6$细胞和低表达$\rm CLDN6$细胞，检测细胞活力，结果如图。

①由图可知，$\rm CLDN6-DM1$能特异性杀伤高表达$\rm CLDN6$细胞，依据是                                                                                  。

②研究发现，$\rm DM1$是一种小分子物质，能够抑制纺锤体微管的形成，由此分析$\rm DM1$能够进入细胞中通过抑制细胞的                过程起到抗癌的作用。

③下图表示抗体$\rm -$药物偶联物$\rm CLDN6-DM1$的作用机制。

由图分析，$\rm CLDN6-DM1$能特异性杀伤高表达$\rm CLDN6$细胞的原因是                                                                                  。若用红色荧光标记的$\rm CLDN6-DM1$和$\rm lgG-DM1$处理肝肿瘤细胞来证明上述机制，则应观察到的现象是                                                                                  。

与低表达$\\rm CLDN6$细胞相比，随$\\rm CLDN6ab—DM1$处理浓度的升高，高表达$\\rm CLDN6$细胞活力下降幅度大，而用$\\rm IgG-DM1$处理两种细胞结果无明显差异；有丝分裂；$\\rm CLDN6—DM1$与高表达$\\rm CLDN6$细胞上的$\\rm CLDN6$蛋白特异性结合的多，进入细胞中，通过溶酶体裂解，将$\\rm DM1$释放出来发挥作用；用红色荧光标记的$\\rm CLDN6—DM1$处理肝肿瘤细胞可在细胞中及溶酶体中检测到红色荧光，而用$\\rm IgG-DM1$处理则不能检测到

①据图可知，与低表达$\rm CLDN6$细胞相比，随$\rm CLDN6ab—DM1$处理浓度的升高，高表达$\rm CLDN6$细胞活力下降幅度大，而用$\rm IgG-DM1$处理两种细胞结果无明显差异，因此$\rm CLDN6-DM1$能特异性杀伤高表达$\rm CLDN6$细胞。

②癌细胞分裂方式为有丝分裂，在有丝分裂前期，由中心体发出的星射线形成纺锤体，$\rm DM1$是一种小分子物质，能够抑制纺锤体微管的形成，据此推测，$\rm DM1$能够进入细胞中通过抑制细胞的有丝分裂过程起到抗癌的作用。

③据图可知，$\rm CLDN6—DM1$包括$\rm 3$部分，抗体、药物$\rm DM1$、接头，抗体部分能与高表达$\rm CLDN6$细胞上的$\rm CLDN6$蛋白特异性结合的多，进入细胞中，通过溶酶体裂解，将$\rm DM1$释放出来发挥作用，因此$\rm CLDN6-DM1$能特异性杀伤高表达$\rm CLDN6$细胞。$\rm lgG-DM1$是无关抗体，不能与肿瘤细胞上的$\rm CLDN6$蛋白结合，因此若用红色荧光标记的$\rm CLDN6-DM1$和$\rm lgG-DM1$处理肝肿瘤细胞来证明上述机制，红色荧光标记的$\rm CLDN6—DM1$处理肝肿瘤细胞可在细胞中及溶酶体中检测到红色荧光，而用$\rm IgG-DM1$处理则不能检测到。