对小鼠注射$\rm NP-KLH$后，通过抗原呈递，激活                                                                细胞为$\rm B$细胞增殖分化提供第二个信号。

辅助性$\\rm T$细胞

$\rm B$细胞的增殖分化需要两个信号，其中第一信号是抗原直接刺激$\rm B$细胞，第二个信号是激活的辅助性$\rm T$细胞与$\rm B$细胞结合。

免疫后第$\rm 7$、$\rm 13$天，采用荧光标记的特定抗体与细胞膜上相应                结合进行识别的方法，对$\rm B$细胞和浆细胞分类计数，计算浆细胞占总$\rm B$细胞的百分比（如图）。由第$\rm 13$天的数据可得出的结论是                                                                。在免疫后第$\rm 7$天，实验组脾脏浆细胞数量平均值低于对照组平均值，但研究者并不能依据该数据得出上述结论，原因是                                                                。

注：图中圆圈表示小鼠不同个体的数据：黑色短横线表示平均值：上方值为统计分析所得概率值，$\rm p\lt 0.05$时表示两组数据有显著差异。

抗原（$\\rm NP-KLH$抗原）；实验组（去除脾神经）的浆细胞比例显著低于对照组（保留脾神经）；第$\\rm 7$天时两组数据差异不显著（$\\rm p\\gt 0.05$），无法排除随机误差的影响

抗原与抗体的结合具有特异性，分析题意可知，荧光标记的抗体需与$\rm B$细胞$\rm /$浆细胞表面的抗原特异性受体（或膜抗体）结合才能识别；据图可知，第$\rm 13$天实验组肝脏浆细胞比例显著低于对照组（$\rm p\lt 0.05$），说明脾神经缺失会降低体液免疫反应；实验数据的得出需要建立在大量数据之上，第$\rm 7$天时两组数据差异不显著（$\rm p\gt 0.05$），可能是由于个体差异或时间不足导致，不能作为结论依据。

研究发现，脾神经末梢与脾脏$\rm T$细胞形成突触样结构，释放去甲肾上腺素促进$\rm T$细胞合成并释放乙酰胆碱（$\rm ACh$），基于$\rm ACh$可与$\rm ACh$受体（$\rm AChR$）结合的事实，结合上述研究，研究者推测：$\rm ACh$通过直接                以实现脾神经兴奋对体液免疫反应的调节作用。

为证实该推测，首先需要确认脾脏$\rm B$细胞是否存在$\rm AChR$。由于小鼠体内存在多种类型的$\rm AChR$，研究者采用$\rm PCR$检测各类型$\rm AChR$的$\rm mRNA$，结果见表。根据该结果，首选$\rm AChR-\alpha9$进行研究，理由是                                                                。

注：生发中心是$\rm B$细胞活化后增殖分化为浆细胞的场所，$\rm +$表示有检出，$\rm +$越多表示检出量越多；$\rm -$表示未检出。

研究者将小鼠$\rm AChR-\alpha9$基因敲除，然后对                进行处理并免疫小鼠，再检测各实验组与对照组小鼠脾脏浆细胞和抗体生成量，从而验证以上推测是否合理。

与$\\rm B$细胞的$\\rm AChR$结合；$\\rm AChR-\\alpha9$在生发中心$\\rm B$细胞中表达量最高（$\\rm +++$），且与体液免疫直接相关；实验组与对照组

$\rm ACh$乙酰胆碱是神经递质，是信息分子，信息分子需要与受体结合后发挥作用，故$\rm ACh$需与$\rm B$细胞的$\rm AChR$结合才能调节体液免疫；分析表格数据，$\rm AChR-\alpha9$在生发中心$\rm B$细胞（浆细胞前体）中表达量最高（$\rm +++$），与免疫反应直接相关，故首选$\rm AChR-\alpha9$进行研究；分析题意，本实验目的是验证$\rm ACh$通过直接与$\rm B$细胞的$\rm AChR$结合以实现脾神经兴奋对体液免疫反应的调节作用，则实验的自变量是$\rm AChR$的有无，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故验证推测需对实验组（$\rm AChR-\alpha9$敲除）和对照组（正常小鼠）进行相同处理，比较浆细胞和抗体量。