$\rm CEFs$是从孵化$\rm 9$天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织需用                                                                处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加                等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。

机械方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等；动物血清

动物细胞培养时，鸡胚组织剪碎后需用胰蛋白酶处理，以获得单细胞悬液。动物细胞培养时一般需要在合成培养基中添加血清等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。

体外获取$\rm OSNL$的方法有                                                                （答出$\rm 1$种即可）。若要在$\rm CEFs$中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和终止子等。启动子功能是                                                                。

$\\rm PCR$技术（人工合成法）；$\\rm RNA$聚合酶识别和结合的位点，驱动目的基因转录出$\\rm mRNA$

$\rm OSNL$为目的基因，体外获取目的基因可从基因文库、通过$\rm PCR$技术大量扩增或通过人工合成法来合成。基因表达载体中除目的基因外，还必须有启动子、终止子、复制原点和标记基因等。启动子是一段有特殊结构的$\rm DNA$片段，位于基因的首端，它是$\rm RNA$聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录开始，最终获得所需要的蛋白质。

$\rm iPS$细胞和$\rm iPGCs$细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是                                                                。

基因的选择性表达

据图可知，由$\rm iPS$细胞诱导形成$\rm iPGCs$细胞经过了细胞分化，该过程遗传物质没有改变，导致其细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是基因的选择性表达。

该实验流程中用到的生物技术有                                                                （答出$\rm 2$点即可）。

基因工程（转基因技术）、动物细胞培养

由图可知，该实验流程中将$\rm OSNL$基因导入鸡胚成纤维细胞利用了基因工程技术，诱导多能干细胞过程利用了动物细胞培养的技术。