在$\rm HCV$感染的急性期，会引发机体的特异性免疫应答。在体液免疫过程中，$\rm B$细胞活化、增殖分化过程需要两次信号刺激，一是抗原的直接刺激，二是                                                                。$\rm B$细胞受到两个信号的刺激后开始分裂、分化，大部分分化为浆细胞，浆细胞产生和分泌大量抗体发挥免疫效应。抗体在浆细胞中合成、运输及分泌过程依次经历的结构是                                                                。

辅助性$\\rm T$细胞表面的特定分子发生变化并与$\\rm B$细胞结合；核糖体$\\rm →$内质网$\\rm →$囊泡$\\rm →$高尔基体$\\rm →$囊泡$\\rm →$细胞膜

病原体侵入机体后，一是抗原直接刺激$\rm B$细胞，这为激活$\rm B$细胞提供了第一个信号，其次抗原呈递细胞将抗原处理后呈递在细胞表面，然后传递给辅助性$\rm T$细胞，辅助性$\rm T$细胞表面的特定分子发生变化并与$\rm B$细胞结合，这为激活$\rm B$细胞提供了第二个信号。抗体属于分泌蛋白，分泌蛋白的合成、运输和分泌过程为：核糖体上合成蛋白质$\rm →$内质网进行粗加工$\rm →$内质网“出芽”形成囊泡$\rm →$高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质$\rm →$高尔基体“出芽”形成囊泡细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量。因此抗体在浆细胞中合成、运输及分泌过程依次经历的结构是：核糖体$\rm →$内质网$\rm →$囊泡$\rm →$高尔基体$\rm →$囊泡$\rm →$细胞膜。

为使单细胞悬液中的$\rm B$淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是                                                                ，图中筛选$\rm 1$所采用的培养基从用途上分类，属于                培养基，使用该培养基进行细胞培养的结果是                                                                。

给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应；选择；只有杂交瘤细胞能正常生长，其他的细胞均不能生长

用丙肝病毒（作为抗原）对小鼠进行免疫后，小鼠的$\rm B$淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾细胞中能获得产生该抗体的$\rm B$淋巴细胞。图中筛选$\rm 1$是用选择培养基筛选出经免疫的$\rm B$淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞，因此筛选过程所采用的培养基属于选择培养基，在该培养基上只有杂交瘤细胞能正常生长，其他的细胞均不能生长。

干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，$\rm \alpha-$干扰素在丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。科学家们采用基因工程技术将干扰素基因导入大肠杆菌生产干扰素。图$\rm 1$、图$\rm 2$分别表示干扰素基因相关限制酶切割位点、质粒结构示意图。

①为确保成功获得基因工程菌，图$\rm 1$和图$\rm 2$最好用                （填限制酶）切割。

②$\rm PCR$过程中延伸阶段选用$\rm 72^\circ\rm C$而非$\rm 95^\circ\rm C$，是综合考虑了两个因素，这两个因素分别是                                                                。

③生产干扰素的工程菌可选用大肠杆菌或酵母菌，选用酵母菌作为受体细胞的优势是                                                                。

$Bam\\rm H$Ⅰ和$Eco\\rm R$Ⅰ；防止$\\rm DNA$变性和为保持耐高温的$\\rm DNA$聚合酶所需温度条件；繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少

①干扰素基因和质粒上都有$ Bam\rm H$Ⅰ和$Eco\rm R$Ⅰ的酶切位点，为了防止反向连接和自身环化，故切割时两种限制酶一起使用，产生两种不同的黏性末端，确保成功获得基因工程菌。

②$\rm DNA$在高温条件下会解旋变性，且酶活性的发挥需要适宜条件，故延伸阶段选用$\rm 72^\circ C$，主要是防止$\rm DNA$变性和为保持$\rm TagDNA$聚合酶所需温度条件。

③基因工程利用大肠杆菌作为受体菌的优点是：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。