基因工程菌是用基因工程的方法，使                得到高效表达的菌类。请判断：上图获得蛋白$\rm A$的过程是否属于蛋白质工程？                （填“是”或“否”）。做出判断的理由是                                                  。

外源基因；否；蛋白$\\rm A$是自然界中已存在的蛋白质

基因工程菌是用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类。上图中基因$\rm A$是自然界存在的基因，获得的蛋白质$\rm A$是自然界中存在的蛋白质，因此上图获得蛋白$\rm A$的过程不属于蛋白质工程。

离体培养小鼠骨髓瘤细胞时，需将培养瓶置于含有                 的混合气体的$\rm CO$₂培养箱中，其中$\rm CO$₂的主要作用是                 。与小鼠骨髓瘤细胞融合前，免疫的脾细胞                 （填“需要”或“不需要”）通过培养进行扩增。

离体培养小鼠骨髓瘤细胞时，需将培养瓶置于含有$\rm 95\%$的空气和$\rm 5\%$的$\rm CO_{2}$的混合气体的$\rm CO_{2}$培养箱中，其中$\rm CO_{2}$的主要作用是维持培养液的$\rm pH$。由于浆细胞是高度分化的细胞，不能增殖，故与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）不需要通过培养扩大细胞数量。

诱导动物细胞融合时特有的方法是                 。

诱导动物细胞融合时特有的方法是灭活病毒诱导法。

在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如$\rm HAT$培养基），该培养基对                                                                    细胞生长具有抑制作用：用病毒外壳蛋白抗体检测的目的是筛选                                                    。

未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的；能分泌所需抗体的杂交瘤细胞

在杂交瘤细胞筛选过程中，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。单克隆抗体筛选中，由于病毒外壳蛋白抗体与该病毒外壳蛋白能特异性结合，因此用该抗体检测呈阳性的细胞，即为所需的杂交瘤细胞。即用病毒外壳蛋白抗体检测的目的是筛选能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。

构建重组质粒需要使用$\rm DNA$连接酶。下列属于$\rm DNA$连接酶底物的是                 。

$\rm DNA$连接酶能连接$\rm DNA$片段，脱氧核苷酸的磷酸基团位于$\rm 5$'端，$\rm -OH$位于$\rm 3$'端，①②③脱氧核苷酸链的两端基团有误（即一个切口的两侧应为$\rm 3$'端一侧是$\rm -OH$，$\rm 5$'端一侧是$\rm -P$）；$\rm DNA$连接酶能催化合成磷酸二酯键，即将一条脱氧核苷酸$\rm 5$'端的磷酸基团与另一条脱氧核苷酸链的$\rm 3$'端的$\rm -OH$相连，④符合题意。故选：④。