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高中 | 二 动物细胞融合技术与单克隆抗体题目答案及解析如下,仅供参考!
选择性必修三 生物技术与工程
第二章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中,需要表达$\rm N$蛋白胞外段,制备相应的单克隆抗体,增加其对$\rm N$蛋白胞外段特异性结合的能力。$\rm N$蛋白胞外段单克隆抗体制备流程如下图:
用$\rm N$蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后,取小鼠脾组织用 方法或 酶处理,制成细胞悬液,置于含有 气体的$\rm CO_{2}$培养箱中培养,离心收集小鼠的$\rm B$淋巴细胞,与骨髓瘤细胞进行融合。
机械;胰蛋白酶、胶原蛋白;$\\rm 95\\%$的空气和$\\rm 5\\%$的$\\rm CO_{2}$
"]]制备细胞悬液可以采用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理,动物细胞培养要放置于$\rm 95\%$的空气和$\rm 5\%$的$\rm CO_{2}$的$\rm CO_{2}$培养箱中培养。
用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选,获得杂交瘤细胞,将其接种到$\rm 96$孔板,进行 培养。用 技术检测每孔中的抗体,筛选既能产生$\rm N$蛋白胞外段抗体,又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株,经体外扩大培养,收集 ,提取单克隆抗体。
用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选,获得杂交瘤细胞,将其接种到$\rm 96$孔板,每个孔尽量只接种一个杂交细胞,进行克隆化培养,利用抗原$\rm —$抗体杂交法筛选,经体外扩大培养,收集细胞培养液,提取单克隆抗体。
利用上述流程制备的$\rm N$蛋白胞外段抗体能准确识别 的细微差异,与之发生特异性结合,并可 ,因此被广泛用作诊断试剂。
单克隆抗体具有准确性强、灵敏度高的特点,能够准确识别抗原直接的细微差距,$\rm N$蛋白胞外段抗体能够识别相应的抗原,与之发生特异性结合,并可大量制备,因此被广泛用作诊断试剂。
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