糖尿病患者由于胰岛$\rm B$细胞分泌的                 不足等原因，导致长期高血糖而引发血管病变，伤口组织缺血、缺氧，难以愈合。

糖尿病患者由于胰岛$\rm B$细胞分泌的胰岛素不足。

血管内皮生长因子（$\rm VEGF$）可诱导血管内皮细胞增殖、迁移和分化，促进血管生成，使受损组织得以修复和再生。研究人员将含有特异性启动子和$\rm VEGF$基因的重组质粒导入乳酸菌中，获得图$\rm 1$所示的工程菌，进行了系列研究。

①用                                处理人脐静脉获得分散的血管内皮细胞。体外培养可观察到由于细胞                                  而形成的单层细胞，利用这些细胞进行分组划痕实验，$\rm 24\;\rm h$后的实验结果如图$\rm 2$所示。结果表明工程乳酸菌具有促进血管内皮细胞                                                                的功能。

注：初始划痕范围内（箭头所示）无细胞，黑色部分为$\rm 24\;\rm h$后内皮细胞在划痕范围的分布区域

②在糖尿病模型小鼠皮肤上制备伤口，分组实验结果（图$\rm 3$）证明工程菌促进伤口愈合的效果最佳，图$\rm 3$中灰色阴影表示                                                                。

③临床治疗时，要将工程菌和抗菌肽（对很多杂菌有强抑制作用）混合注射至伤口处，请综合图$\rm 1$分析抗菌肽的作用                                                                。

胰蛋白酶$\\rm /$胶原蛋白酶；接触抑制$\\rm /$贴壁生长；迁移；未愈合伤口的比例；抗菌肽作为信息分子，通过系列信号转导途径作用于特异性启动子，促进$\\rm VEGF$基因转录；抑制伤口处杂菌繁殖，为工程菌创造竞争优势

①动物细胞培养时，首先用胰蛋白（或胶原蛋白）酶处理血管内皮组织，使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，然后将其放入含 血清、血浆等一些天然成分的合成培养基中培养；在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。由图知，$\rm 24\;\rm h$后，含工程乳酸菌的划痕宽度比对照组变小，说明工程乳酸菌具有促进血管内皮细胞增殖、迁移的功能。

②由图$\rm 3$可知，一开始各组小鼠伤口比例为$\rm 100\%$，之后对照组愈合最慢，工程乳酸菌愈合最快，所以最后工程乳酸菌组伤口最小，阴影部分代表未愈合伤口比例。

③伤口会感染很多杂菌，抗菌肽作为信息分子，通过系列信号转导途径作用于特异性启动子，促进$\rm VEGF$基因转录；抑制伤口处杂菌繁殖，为工程菌创造竞争优势，利于工程菌繁殖。