$\rm PTH$在甲状旁细胞的                 上合成，经加工，通过                 作用分泌到细胞外。

分析题意可知，甲状旁腺激素$\rm (PTH)$是一种多肽，多肽的合成场所是核糖体；多肽属于大分子物质，分泌到细胞外的方式是胞吐。

人工合成$\rm PTH$肽链$\rm 1-25$氨基组成的多肽（$\rm A$肽）和$\rm 39$~$\rm 84$氨基酸组成的多肽（$\rm B$肽），分别用$\rm A$肽、$\rm B$肽多次免疫小鼠。

①取免疫后小鼠的血清，以                 的血清为阴性对照，检测血清中抗$\rm PTH$抗体的效价（效价越高表明免疫效果越好），以确保小鼠体内产生了能分泌抗$\rm PTH$抗体的浆细胞。

②取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞混合，加入                                                                诱导细胞融合，并用特定的选择培养基进行筛选。对获得的杂交瘤细胞进行                                                                ，经多次筛选获得$\rm 5$个能稳定分泌抗$\rm PTH$单抗的细胞株。

③将$\rm 5$个杂交瘤细胞株分别注射到                 ，一段时间后分离获得抗$\rm PTH$的$\rm 5$种单抗，分别是对应$\rm A$肽的$\rm A1$，对应$\rm B$肽的$\rm B1$、$\rm B2$、$\rm B3$、$\rm B4$。

①为确保小鼠体内产生了能分泌抗$\rm PTH$抗体的浆细胞，需要用免疫后小鼠的血清与免疫前小鼠作对照，以检测血清中抗$\rm PTH$抗体的效价。②$\rm PEG/$聚乙二醇$\rm /$灭活病毒可促进动物细胞的融合；单克隆抗体制备过程中，有两次筛选，其中第二次筛选是对获得的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选获得$\rm 5$株能稳定分泌抗$\rm PTH$单抗的细胞。③单克隆抗体制备时既可进行体内培养也可在体外培养，其中体内培养是将杂交瘤细胞株分别注射到小鼠腹腔，一段时间后分离获得抗$\rm PTH$单抗。

经抗体配对检测后，筛选出$\rm A1$、$\rm B1$用于定量检测$\rm PTH$。将$\rm B1$固定在固相载体上作为捕获抗体，用辣根过氧化物酶标记$\rm A1$，建立定量检测$\rm PTH$的方法（如图）。

①据图分析，捕获抗体、酶标抗体与待测样本中$\rm PTH$在结构上的关系是                                                                。

②因为在一定范围内                                                                ，所以可通过检测显色反应后棕色的深浅来测定$\rm PTH$的含量。

排获抗体和酶标抗体特异性结合于$\\rm PTH$的不同位点；

棕色的深浅与样品中$\\rm PTH$含量呈正相关

① 据图分析，捕获抗体和酶标抗体与待测样本中$\rm PTH$的关系是：捕获抗体和酶标抗体特异性结合于$\rm PTH$的不同位点。②据图可知，$\rm PTH$与捕获抗体结合后，再加入酶标抗体。经洗涤丙加入底物后可产生棕色底物，且在一定范围内棕色的深浅与样品中 $\rm PTH$含量呈正相关，故可通过检测显色反应后棕色的深浅来测定$\rm PTH$的含量。

研究表明，人体内除全长$\rm PTH$外，还存在$\rm PTH$的$\rm 7$~$\rm 84$氨基酸肽段，它与全长$\rm PTH$的生物学功能完全相反。为更准确地检测血中全长$\rm PTH$的含量，请对上述检测方法提出改进思路                                                                。

制备针对$\\rm PTH1$~$\\rm 6$氨基酸组成的多肽的单抗作为酶标抗体，避免$\\rm 7$~$\\rm 84$肽段的干扰

分析题意，人体内除全长$\rm PTH$外，还存在$\rm PTH$的$\rm 7$~$\rm 84$ 氨基酸肽段，它与全长$\rm PTH$的生物学功能完全相反，即$\rm 7$~$\rm 84$ 氨基酸肽段的存在会干扰上述检测结果的准确性，故应制备针对 $\rm PTH$ $\rm 1$~$\rm 6$氨基酸组成的多肽的单抗作为酶标抗体，避免$\rm 7$~$\rm 84$肽段的干扰。