制备生产$\rm HIV$单克隆抗体时，诱导动物细胞融合特有的方法是                法，融合实验完成后得到的杂交瘤细胞的特点是                                                                。将杂交瘤细胞转到$\rm 96$孔板上培养，吸取有克隆生长的细胞培养孔中的                （填“上清液”或“沉淀细胞”），应用                技术进行抗体阳性检测，经多次筛选、培养，获得$\rm HIV$单克隆抗体。

灭活病毒诱导；既能无限增殖，又能产生抗体；上清液；抗原抗体杂交

制备生产$\rm HIV$单克隆抗体时，诱导动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。杂交瘤细胞具有既能无限增殖，又能产生抗体的特点。由于抗体蛋白质相对质量较轻，又因为抗体由细胞分泌出细胞，因此需要在吸取有克隆生长的细胞培养孔中的上清液，利用利用抗原—抗体杂交技术最后选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，经多次筛选、培养，获得$\rm HIV$单克隆抗体。

研究人员拟用$\rm RT-PCR$技术扩增$\rm HIV$特异性片段，已知$\rm HIV$得到的$\rm cDNA$特异性片段的一条链为$\rm 5'-ATTCCATATC\cdots CCATGCC-3'$，设计了一条引物为$\rm 5'-GGCATG\cdots-3'$，另一条引物为                （写出$\rm 6$个碱基）。

$\\rm 5'-ATTCCA-3'$

根据$\rm HIV$的$\rm cDNA$特异性片段的序列，考虑引物方向，扩增引物碱基序列应与该片段的双链分别进行碱基互补配对，一条引物为$\rm 5'-GGCATG\cdots-3'$，则另一条引物为$\rm 5'-ATTCCA'-3$'（该引物与另一条部分碱基互补，而$\rm 5'-ATTCCATATC\cdots CCATGCC-3'$与该链互补）。

要形成正确有效的重组质粒，选择适当的限制酶很重要，据图分析选择                最佳，$\rm DNA$重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，图示质粒缺少的元件是                。

$Hin\\rm d$Ⅲ和$Eco\\rm R$Ⅰ；终止子和复制起点

图中$ Eco\rm R$Ⅴ能将$\rm HIV$特异序列切割不能选用，为了让目的基因正向链接，则只能选择$Hin\rm d$Ⅲ和$Eco\rm R$Ⅰ对质粒和目的基因进行切割。 载体大致应有下列一些特性分子量小、具有复制起点；具有多种常用的限制性内切酶的位点；具有标记基因，便于鉴定和筛选；具有启动子和终止子，便于基因的转录，则图中的质粒缺少了启动子和复制起点。