启动子是一段驱动基因转录的$\rm DNA$片段，位于转录模板链的                 （填“$\rm 5'$”或“$\rm 3'$”）端。

启动子是一段驱动基因转录的$\rm DNA$片段，是$\rm RNA$聚合酶识别和结合的位点，位于转录模板链的$\rm 3'$。

$\rm PDC$基因的启动子序列未知，为获得大量该基因启动子所在片段，可将已知序列信息的接头片段连接在$\rm PDC$基因的                （填“上”或“下”）游，根据                                                                ，设计引物进行$\rm PCR$扩增，对$\rm PCR$产物进行琼脂糖凝胶电泳时，由于$\rm DNA$分子因含磷酸基团而带负电，凝胶加样孔应靠近电泳槽                （填“正极”或“负极”）接口。

上；接头上段和$\\rm PDC$基因编码序列；负极

$\rm PDC$基因的启动子序列未知，为获得大量该基因启动子所在片段，可将已知序列信息的接头片段连接在$\rm PDC$基因的上游，且已知序列信息，则可以按照$\rm PDC$基因启动子上游的接头片段与$\rm PDC$基因编码序列设计引物进行$\rm PCR$扩增，对$\rm PCR$产物进行琼脂糖凝胶电泳时，由于$\rm DNA$分子因含磷酸基团而带负电，凝胶加样孔应靠近电泳槽负极接口，在凝胶电泳时$\rm DNA$分子会由负极向正极移动。

利用质粒$\rm A$构建含有$\rm PDC$基因启动子片段的重组质粒并导入不能合成尿嘧啶的酵母菌，用                的培养基筛选成功转化的酵母菌$\rm Y1H$；将从甜柿中提取的$\rm RNA$逆转录形成的各种$\rm cDNA$分别与质粒$\rm G$连接后导入酵母菌，此时应选择质粒$\rm G$中的位点                （填序号$\rm 1\sim 5$）作为其插入位点，最终获得携带不同$\rm cDNA$片段的酵母菌群$\rm Y187$。

质粒$\rm A$的图可知带有选择功能的基因片段有尿嘧啶合成基因、金担子素抗性基因两种，但是金担子素抗性基因无法启动，所以选择尿嘧啶合成基因作为选择依据，则在选择培养基配置时不加尿嘧啶。$\rm cDNA$片段需要插入启动子之后，且不能破坏其他蛋白质基因的表达，因此选择$\rm 2$作为$\rm cDNA$的插入位点。

重组酵母菌$\rm YIH$分别与携带不同$\rm cDNA$片段的酵母菌$\rm Y187$进行接合生殖，形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。将接合子接种在                                                                中，观察菌落生长情况能判断其含有的待测蛋白是否为$\rm PDC$基因的调控蛋白。

含有金担子素的培养基

依据题干，重组酵母$\rm Y187$与$\rm Y1H$接合子应同时含有质粒$\rm A$，质粒$\rm G$，则接合子有质粒$\rm A$为含有$\rm PDC$基因、金担子素抗性基因的质粒；质粒$\rm G$为可正常表达$\rm AD$蛋白、待测蛋白的质粒，若质粒$\rm A$、$\rm G$正常执行功能，则$\rm AD$蛋白携带的待测蛋白靠近$\rm PDC$基因启动子，激活$\rm PDC$基因的转录，并激活金担子素抗性基因的表达，使酵母菌表现出金担子素抗性，因此若接合子能在含有金担子素的培养基生存，则推测待测蛋白是$\rm PDC$基因的调控蛋白。