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高中 | 二 动物细胞融合技术与单克隆抗体题目答案及解析如下,仅供参考!
选择性必修三 生物技术与工程
第二章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
癌症免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞,克服肿瘤的免疫逃逸。科研人员在研究中发现多种免疫治疗方法结合是提高治疗效果的途径之一。
图$\rm 2$
某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白$\rm PSMA$和$\rm PD-L1$,如图$\rm 1$。$\rm PD-L1$能抑制$\rm T$细胞的活化,使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用$\rm PD-1$的单克隆抗体进行癌症治疗。其制备方法如下:将等量的纯化$\rm PD-1$蛋白分别注射到$\rm 5$只小鼠体内,再经过二次免疫后测定小鼠抗$\rm PD-1$抗体的免疫效果,取免疫效果最好的小鼠用于后面的融合实验。该过程中,进行二次免疫的目的是 。接着从小鼠的 中取$\rm B$淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
刺激机体产生更多相应的$\\rm B$淋巴细胞;脾
"]]单克隆抗体制备过程中,为刺激机体产生更多相应的$\rm B$淋巴细胞,需要进行二次免疫;需要从小鼠的脾中取$\rm B$淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
一段时间后,将($\rm 1$)所得细胞接种到$\rm 96$孔培养板上,静置培养一段时间,进行抗体阳性检测,如图$\rm 2$。
①检测原理是 。在检测时需要将$\rm PD-1$蛋白固定于固相载体表面,并加入$\rm 96$孔板培养槽中的 (沉淀$\rm /$上清液),即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间,需要用洗涤剂将未与 结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色,颜色 (填“深”或“浅”)的组更符合需求。
①利用抗原与抗体的特异性结合的原理,进行抗体阳性检测;单克隆抗体是分泌蛋白,分布在上清液中,所以在固定抗原上加入多孔板培养槽中的上清液,即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间,为了排除干扰,则需要用洗涤剂将未与抗$\rm PD-1$抗体结合的酶标抗体洗去。
③$\rm PD-1$蛋白与抗$\rm PD-1$抗体的结合量越多颜色越深,所以加入相应酶促反应底物显色后,颜色的深浅可代表与抗$\rm PD-1$抗体的量,颜色深的组更符合需求。
$\rm CD28$是$\rm T$细胞表面受体,$\rm T$细胞的有效激活依赖于$\rm CD28$在癌细胞与$\rm T$细胞结合部位的聚集。因此,科研人员尝试构建既能结合$\rm PSMA$,还能结合$\rm CD28$的双特异性抗体$\rm PSMA\times CD28$,如图$\rm 3$。这种双特异性抗体的优势在于 。
图$\rm 3$
使$\\rm T$细胞更容易(更精确或更高概率)接触到癌细胞
"]]分析题意,$\rm CD28$是$\rm T$细胞表面受体,$\rm T$细胞的有效激活依赖于$\rm CD28$在癌细胞与$\rm T$细胞结合部位的聚集,构建既能结合$\rm PSMA$,还能结合$\rm CD28$的双特异性抗体$\rm PSMA\times CD28$,如图$\rm 3$。这种双特异性抗体的优势在于使$\rm T$细胞更容易(更精确或更高概率)接触到癌细胞。
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