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高中 | 一 动物细胞培养题目答案及解析如下,仅供参考!
选择性必修三 生物技术与工程
第二章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
一 动物细胞培养
$\rm Period2$($\rm Per2$)基因是一种抑癌基因,干扰$\rm Per2$基因表达有利于肿瘤细胞存活和促进肿瘤发生。$\rm p53$肿瘤抑制因子是一个关键的转录因子,能调节$\rm DNA$修复、细胞周期、衰老凋亡等相关细胞途径,是抵抗癌症发生的重要防御因子,并且是通过与癌蛋白$\rm MDM2$负调控作用调节其功能。为探究裸鼠体内下调$\rm Per$基因对人胶质瘤细胞$\rm U343$细胞株中$\rm P53$的可能调控机制,科研人员做了如下实验:
Ⅰ.裸鼠胶质瘤模型构建
培养$\rm U343$细胞需将营养物质按种类和所需量严格配制,这样的培养基称为 ,常在培养基中加入 等一些天然成分。同时,为了保证无菌无毒的环境,必须 。
将细胞所需营养物质按种类和所需量严格配制,这样的培养基称为合成培养基,由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,常在培养基中加入血清(血浆)等天然物质,同时,为了保证无菌无毒的环境对培养液和所有培养用进行灭菌处理,以及在无菌环境下操作。培养液还需要定期更换。
以人工合成的低表达$\rm Per2$基因为目的基因,以某种病毒作为运载体,构建重组$\rm DNA$,导入到培养好的$\rm U343$胶质瘤细胞中(实验组),同时还需要设置$\rm 2$组对照,分别为: (对照组$\rm 1$)、空白对照组($\rm U343$)(对照组$\rm 2$)。
每组等量同龄健康裸鼠,皮下相同部位分别注入上述组别的$\rm U343$细胞,适宜条件下培养,定期记录瘤体体积,记录到成瘤(体积达$\rm 1000\;\rm mm^{3}$)的时间,取出瘤体,提取蛋白质。
转入同种病毒到$\\rm U343$胶质瘤细胞中
"]]实验目的:探究裸鼠体内下调$\rm Per$基因对人胶质瘤细胞$\rm U343$细胞株中$\rm P53$的可能调控机制。实验变量:细胞中是否含有$\rm Per$基因。实验设计:①实验组:人工合成低表达$\rm Per2$基因,以某种病毒作为运载体,构建重组$\rm DNA$,导入到培养好的$\rm U343$胶质瘤细胞中(实验组)。②对照组$\rm 1$:为了排除病毒对实验结果的影响,将同种病毒转入到培养好的$\rm U343$胶质瘤细胞中。③对照组$\rm 2$:作为空白对照,培养好的$\rm U343$胶质瘤细胞。
$\rm II$.实验结果
实验组小鼠成瘤时间短于两对照组,且相同时间内实验组瘤体体积大于两对照组。
电泳检测各组$\rm U343$胶质瘤细胞中相关蛋白质含量(条带宽度与含量呈正相关),如图所示。
注:图中从左向右依次为实验组、对照组$\rm 1$、对照组$\rm 2$。
$\rm Per2$基因低表达可明显促进胶质瘤的发生发展,根据上图及相关信息,请你提出一种可能的调控机制: ,导致胶质瘤的发生和发展。
$\\rm Per2$基因低表达,抑制$\\rm p53$的表达,促进$\\rm MDM2$的表达,$\\rm MDM2$负调控$\\rm P53$,使$\\rm p53$表达量更低。
"]]由图可知$\rm Per2$蛋白含量与$\rm p53$的含量成正比,说明$\rm Per2$高表达促进$\rm p53$的表达。$\rm Per2$蛋白含量和$\rm MDM2$的含量成反比,说明$\rm Per2$高表达抑制$\rm MDM2$的表达。$\rm Per2$基因低表达时,抑制$\rm p53$的表达,促进$\rm MDM2$的表达,而$\rm MDM2$的表达可负调控$\rm P53$,使$\rm p53$的表达量更低,导致胶质瘤的发生和发展。
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