将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及$\rm (\qquad)$

制备细胞悬液

置于$\\rm 5\\text{ }\\!\\!\\%\\!\\!\\text{ C}{{\\text{O}}_{2}}$等适宜条件下培养

离心收集细胞

用胰蛋白酶消化支架后分离片层

动物细胞培养条件：（$\rm 1$）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（$\rm 2$）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（$\rm 3$）温度和$\rm pH$：哺乳动物多以$\rm 36.5^\circ\rm C$为宜，最适$\rm pH$为$\rm 7.2-7.4$。（$\rm 4$）气体环境：$\rm 95\%$空气（细胞代谢必需的）和$\rm 5\%$的$\rm CO_{2}$（维持培养液的$\rm pH$。）

$\rm A$、动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，$\rm A$正确；

$\rm B$、置于$\rm 5\text{ }\!\!\%\!\!\text{ C}{{\text{O}}_{2}}$等适宜条件下培养，其中$\rm 5\%$的$\rm CO_{2}$可维持培养液的$\rm pH$，$\rm B$正确；

$\rm C$、在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，$\rm C$正确；

$\rm D$、不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，$\rm D$错误。

故选：$\rm D$。