高中 | 第1节 重组DNA技术的基本工具 题目答案及解析

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选择性必修三 生物技术与工程

第三章 基因工程

第1节 重组DNA技术的基本工具

下图表示某种绿色荧光蛋白基因表达载体的构建过程。绿色荧光蛋白基因有$\rm 720$个碱基对$\rm (bp)$,质粒有$\rm 5369$个碱基对$\rm (bp)$,其上酶切位点和标记基因如图$\rm 1$

  

限制酶$Bam\rm H$Ⅰ的识别序列和切割位点是$\rm G↓GATCC$,则该酶切割$\rm DNA$后形成的黏性末端是                

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限制酶$Bam\rm H$Ⅰ的识别序列和切割位点是$\rm G↓GATTC$,则该酶切割$\rm DNA$后形成的黏性末端是   或     。  

②过程可以通过$\rm PCR$技术进行,为了准确获取目的基因,设计引物对是关键。设计引物对的依据是                                                                

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绿色荧光蛋白基因两端的部分$\\rm DNA$序列

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目的基因的扩增可以通过$\rm PCR$技术进行,为了准确获取目的基因,设计引物对是关键,设计引物对的依据绿色荧光蛋白基因两端的部分$\rm DNA$序列。

基因工程中常用限制酶酶切后再电泳的方法进行重组质粒的鉴定和筛选,电泳时$\rm DNA$片段的迁移速率与片段大小呈负相关。图$\rm 1$中原质粒经$ Bam\rm H$Ⅰ、$Hin\rm d$Ⅲ双酶切后,其中出现长度为$\rm 5300\;bp$$\rm DNA$条带,若原质粒经$Bam\rm H$Ⅰ单酶切后电泳图谱如图$\rm 2$所示,则重组质粒用$Bam\rm H$Ⅰ单酶切后得到的$\rm DNA$产物长度为                $\rm bp$,请在图$\rm 2$中标出其电泳条带的大致位置                

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$\\rm 6020\\;bp$

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绿色荧光蛋白基因有$\rm 720$个碱基对$\rm (bp)$,原质粒有$\rm 5369$个碱基对$\rm (bp)$,原质粒经$ Bam\rm H$Ⅰ、$Hin\rm d$Ⅲ双酶切后,其中出现长度为$\rm 5300\;bp$$\rm DNA$条带,重组质粒的长度$\rm =5300+720=6020\;kb$。用$\rm BamHI$单酶切割长度也不变,有$\rm 5369$个碱基对$\rm (bp)$,由于电泳时$\rm DNA$片段的迁移速率与片段大小呈负相关,因此电泳后重组质粒($\rm 6020\;kb$)在图$\rm 2$中质粒之上,如图所示:    。

该基因工程中的受体细胞无任何抗生素抗性,某同学用只含有氨苄青霉素的培养基筛选导入重组质粒的受体细胞,这样处理不能成功的原因是                                                                

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导入质粒或重组质粒的受体细胞都具有氨苄青霉素抗性,都能正常生长

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由于该基因工程中的受体细胞无任何抗生素抗性,而导入质粒或重组质粒的受体细胞都具有氨苄青霉素抗性,都能正常生长,因此用只含有氨苄青霉素的培养基筛选导入重组质粒的受体细胞不能成功。

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