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高中 | 二 动物细胞融合技术与单克隆抗体题目答案及解析如下,仅供参考!
选择性必修三 生物技术与工程
第二章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
目前用于治疗人类疾病的单克隆抗体大多数是鼠源单抗,人体对鼠源单抗有一定的排斥反应。科研人员根据抗体的结构特点对鼠源单抗进行改造,思路如图甲。获得相关基因后,利用$\rm PCR$技术进行融合得到目的基因,将其与乳腺细胞表达载体$\rm PBCI$构建形成重组$\rm DNA$分子。目的基因、表达载体$\rm PBCI$的结构如图乙所示。请回答下列问题:
图甲所示的改造思路属于 工程的范畴,鼠源单抗的 (填“可变区”或“恒定区”)易被免疫细胞识别引发排斥反应。
改造抗体,产生了自然界中原来没有的蛋白质,属于蛋白质工程的内容;由于是用人源的恒定区取代了鼠源的恒定区,推测出鼠源单抗的恒定区更易引发免疫排斥。
构建重组$\rm DNA$分子时,应选择限制酶 切割目的基因与$\rm PBCI$载体,以便后续通过 (填“红色”、“蓝色”或“紫色”)荧光检测筛选。
由于目的基因两端均存在$\rm MboI$的识别位点,为了保证目的基因能够按照正确的方向转录,只能选用$\rm ScaI$和$\rm XbaI$这两个酶切位点;目的基因的插入破坏了蓝色荧光蛋白基因,后续只能根据红色荧光蛋白来筛选。
通常将重组$\rm DNA$分子导入小鼠的 (填细胞名称),在培养液中加入 以筛选目标细胞,再经过 工程获得大量转基因小鼠。
转基因动物通常是将重组$\rm DNA$分子导入动物细胞的受精卵中;由于红色荧光蛋白所用的$\rm P2$启动子为四环素诱导型启动子,需要在培养基中加入四环素才能诱导标记基因的表达;将受精卵培育成个体,属于胚胎工程。
通过抗原$\rm —$抗体杂交技术检测转基因小鼠乳汁中的改造抗体水平,发现其含量较低,原因可能是 、抗体的组装及分泌过程受阻等。
山羊乳腺特异性表达启动子在小鼠中作用效果不理想
"]]通常采用抗原$\rm -$抗体杂交技术来检测改造抗体的表达水平;由于目的基因采用的启动子为山羊乳腺中特异性表达基因的启动子,在小鼠细胞中,其启动能力变弱,导致目的基因的表达变少。
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