高中 | 二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 题目答案及解析

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选择性必修三 生物技术与工程

第二章 细胞工程

第2节 动物细胞工程

二 动物细胞融合技术与单克隆抗体

某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中,需要表达$\rm N$蛋白胞外段,制备相应的单克隆抗体,增加其对$\rm N$蛋白胞外段特异性结合的能力。$\rm N$蛋白胞外段抗原制备流程如图$\rm 1$,分析回答下列问题:

用脂质体(如图$\rm 2$)将重组慢病毒质粒导入病毒包装细胞,质粒被包在脂质体                 (填“$\rm a$”或“$\rm b$”)处。

[["$\\rm b$"]]

重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞需要依赖膜融合,故质粒被包在脂质体双分子层中,即$\rm b$层处。

质粒在包装细胞内组装出由                                                                组成的慢病毒,用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化$\rm N$蛋白胞外段。

[["

蛋白质外壳和含$\\rm N$蛋白胞外段基因的核酸

"]]

由于目的基因为$\rm N$蛋白胞外段基因,在包装细胞内组装出由蛋白质外壳和含有$\rm N$蛋白胞外段基因的核酸组成的慢病毒,用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化$\rm N$蛋白胞外段。

$\rm N$蛋白胞外段单克隆抗体制备流程如图$\rm 3$,分析回答下列问题:

$\rm N$蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后,取小鼠脾组织用                                                                酶处理,制成细胞悬液,置于含有混合气体的                中培养,离心收集小鼠的$\rm B$淋巴细胞,与骨髓瘤细胞进行融合,利用了细胞膜                的结构特点。

[["

胰蛋白酶或胶原蛋白;$\\rm CO_{2}$培养箱;一定流动性

"]]

进行动物细胞培养时,需要取小鼠脾组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,制成细胞悬液,置于含有$\rm 95\%$空气和$\rm 5\%$$\rm CO_{2}$混合气体的$\rm CO_{2}$培养箱中培养,利用了细胞膜一定流动性的结构特点。

用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选获得杂交瘤细胞,将其接种到$\rm 96$孔板,进行克隆化培养。用                                                                技术检测每孔中的抗体,筛选既能产生$\rm N$蛋白胞外段抗体,又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株,将其进行扩大培养,扩大培养的方法有                                                                ,经扩大培养后,提取单克隆抗体。

[["

抗原$\\rm -$抗体杂交;体外培养或在小鼠腹腔中培养

"]]

用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选,获得杂交瘤细胞,将其接种到$\rm 96$孔板,进行克隆化培养和抗体检测。用抗原抗体杂交技术检测每孔中的抗体,筛选既能产生$\rm N$蛋白胞外段抗体,又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株,经体外扩大培养,扩大培养的方法有体外培养或在小鼠腹腔中培养,经扩大培养后,提取单克隆抗体。

利用此方法获得的单克隆抗体的优点是                                                                

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能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备

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利用此方法获得的单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。

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