从物质和能量转化角度分析，叶绿体的光合作用即在光能驱动下，水分解产生                 ；光能转化为电能，再转化为                 中储存的化学能，用于暗反应的过程。

在植物光反应过程中，叶绿体中光合色素吸收的光能，驱动水在光下分解产生$\rm O_{2}$和$\rm H^{+}$，$\rm H^{+}$与$\rm NADP^{+}$结合，形成$\rm NADPH$。该过程中光能转化为电能，电能再转化为储存在$\rm ATP$和$\rm NADPH$中的化学能，用于暗反应的过程。

长期缺钾导致该植物的光饱和点                （填“升高”或“降低”），理由是                                                                。

降低；长期缺钾不仅导致气孔导度降低，还让$\\rm Rubisco$的羧化酶活性下降，暗反应受阻，光合作用下降，而呼吸作用不受影响，因此光饱和点降低。

光饱和点是光合速率达到最大值时所需要的最小光照强度。由题意可知：长期缺钾不仅导致气孔导度降低，还让$\rm Rubisco$的羧化酶活性下降，暗反应受阻，光合作用下降，而呼吸作用不受影响，因此该植物的光饱和点降低。

现发现该植物群体中有一植株，在正常供钾条件下，总叶绿素含量正常，但气孔导度等其他光合作用相关指标均与缺钾时相近，推测是$\rm Rubisco$的编码基因发生突变所致。$\rm Rubisco$由两个基因（包括$\rm 1$个核基因和$\rm 1$个叶绿体基因）编码，这两个基因及两端的$\rm DNA$序列已知。拟以该突变体的叶片组织为实验材料，以测序的方式确定突变位点。写出关键实验步骤：①                                                                ；②                                                                ；③                                                                ；④基因测序；⑤                                                                。

分别提取该组织细胞的细胞核$\\rm DNA$和叶绿体$\\rm DNA$（取突变体叶片，提取$\\rm DNA$）；根据编码$\\rm Rubisco$的两个基因的两端$\\rm DNA$序列设计相应引物；利用提取的$\\rm DNA$和设计的引物分别进行$\\rm PCR$扩增并电泳；和已知基因序列进行比较

$\rm Rubisco$由两个基因（包括$\rm 1$个核基因和$\rm 1$个叶绿体基因）编码，这两个基因及两端的$\rm DNA$序列已知，因此检测某植物$\rm Rubisco$的编码基因是否突变的基本思路是利用$\rm PCR$技术扩增突变体的相应基因，测序后和已知序列进行比较。其具体步骤为：①分别提取该组织细胞的细胞核$\rm DNA$和叶绿体$\rm DNA$（取突变体叶片，提取$\rm DNA$）；②根据编码$\rm Rubisco$的两个基因的两端$\rm DNA$序列设计相应引物；③利用提取的$\rm DNA$和设计的引物分别进行$\rm PCR$扩增并电泳；④基因测序；⑤和已知基因序列进行比较。