培育转基因抗除草剂玉米的核心工作步骤是                                                                ；通常采用                技术获得大量的除草剂抗性基因。

基因表达载体的构建；$\\rm PCR$

基因工程的核心步骤是基因表达载体构建，目的是要让目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。$\rm PCR$根据$\rm DNA$半保留复制的原理，在体外提供参与$\rm DNA$复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制。

将除草剂抗性基因插入到$\rm Ti$质粒中$\rm T-DNA$上的目的是                                                                。

让目的基因随着$\\rm T-DNA$一起转移到被侵染的细胞，并整合到该细胞的染色体$\\rm DNA$上

农杆菌细胞内含有$\rm Ti$质粒，当它侵染植物细胞后，能将$\rm Ti$质粒上的$\rm T-DNA$（可转移的$\rm DNA$）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体$\rm DNA$上。

通过在培养基中添加                进行“筛选$\rm 1$”，为了排除假阳性干扰，需通过在培养基中添加                                                                进行“筛选$\rm 2$”。

氨苄青霉素；无色物质$\\rm K$或者除草剂和无色物质$\\rm K$

筛选$\rm 1$的目的是获得含有目的基因的农杆菌，需要借助质粒上的标记基因，所以添加氨苄青霉素，由于报告基因在原核细胞中无法表达，在真核中才能表达，为了排除假阳性，在筛选$\rm 2$时要添加无色物质$\rm K$。

科研人员在研究转基因抗除草剂玉米的遗传稳定性时，发现$\rm 60$株玉米中有$\rm 8$株该基因的遗传不符合孟德尔遗传的分离比，在它们的后代中出现了较多没有抗除草剂能力的植株，其原因可能是                                                                （答出一点即可）。

多个基因同时插入，导致基因失活；除草剂抗性基因发生了新的突变导致其功能丧失；外源基因丢失；外源基因重排等。

外源基因插入基因组中可能为单位点插入，或者同一染色体多位点插入，或者不同染色体多位点插入。大多数情况下，插入的位点难以做到定点插入；插入的拷贝数也是随机的。因此，外源基因在转基因植物中的遗传是很复杂的。除此之外，外源基因丢失、基因重排等也都可能影响外源基因的稳定性。